Introducción:
Este método de tinción se diferencia de los métodos clásicos ( Giemsa y Wright ) en que en estos dos métodos había que extender el colorante sobre la extensión, al contrario que pasa con el panóptico rápido, que es un método de inmersión, es decir, sumergimos la extensión en la solución colorante durante un determinado tiempo.
De este método también destaca su rapidez de ejecución, aproximadamente 15 segundos.
Materiales empleados:
-Papel de filtro.
-Frasco lavador.
-2 portas para realizar la extensión sanguínea.
-Guantes desechables y bata.
-Pipeta Pasteur de vidrio.
-Alcohol , lanceta y gasas ( si vamos a utilizar sangre capilar fresca ).
-Cubetas de Wertheim o similares.
-Microscopio óptico.
Reactivos utilizados para esta práctica:
-Agua destilada del frasco lavador.
-Aceite de inmersión.
-Solución nº 1: Solución alcohólica de triarilmetano.
-Solución nº 2: Solución tamponada de xanteno.
-Solución nº 3: Solución tamponada de tiazina.
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| Solución 1 |
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| Solución 2 |
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| Solución 3 |
Muestra específica:
Sangre capilar fresca o sangre venosa anticoagulada. Hay que realizar un frotis con un tipo de sangre y dejar secar.
Objetivos de la tinción panóptico rápido:
-Utilizar un método distinto a los clásicos ( Giemsa y Wright ) que es de inmersión y mucho más rápido (aproximadamente 15 segundos ).
-Conocer las diferencias entre el método de tinción panóptico rápido y las otras tinciones clásicas.
-Decir el tiempo que debe sumergirse la extensión en cada una de las tres soluciones.
-Decir cuál es la solución fijadora.
Procedimiento:
1. En las tres cubetas de Wertheim vertimos las tres soluciones ( una en cada cubeta ).
2. Sumergimos el porta en el que tenemos la extensión en la solución nº 1 durante 1 segundo.Repetimos la inmersión cuatro veces ( en total 5 segundos ) y dejamos escurrir.
3. A continuación sumergimos otras cinco veces, cada una de un segundo de duración, en la cubeta con la soluciónº 2 y dejamos escurrir otra vez.
4. Luego, sumergimos otras cinco veces de un segundo cada una en la cubeta con la solución nº 3.
5. Por último, lavamos con agua destilada la extensión y dejamos secar.
6. Solo queda observar al microscopio con el objetivo de 100 x con ayuda del aceite de inmersión.
Interpretación de los resultados:
-Las diferencias entre este método y las tinciones de Giemsa y Wright son:
* Es un método mucho más rápido, se tardan aproximadamente 15 segundos.
* Es un método de inmersión, la extensión se sumerge en las distintas soluciones, al contrario que las otras tinciones, que hay que extender el colorante sobre la extensión.
-En la primera solución debe sumergirse la extensión 5 segundos ( 5 veces de 1 segundo de duración ).
En la segunda solución debe sumergirse otros 5 segundos ( 5 veces de 1 segundo de duración ).
En la tercera solución hay que hacer lo mismo que en las anteriores, sumergir 5 segundos ( 5 veces de 1 segundo de duración ). En total el proceso dura 15 segundos.
-La solución fijadora es la nº 1 porque contiene alcohol.
Al observar al microscopio esto es lo que hemos visto :
Con este último método hemos conseguido observar los leucocitos.
Que reactivos usan para cada paso de la tincion
ResponderEliminarEl primero es un fijador (azul claro), el segundo es un derivado de la eosina (rojo) y el ultimo es un derivado de la tiacina (azul oscuro)
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