Práctica: Realización de una extensión sanguínea.

Fecha: 7/11/2014

Descripción de la práctica:

Las extensiones sanguíneas se realizan para poder obtener una capa fina de células sanguíneas y observarlas al microscopio.
Se llevan a cabo poniendo una gota de sangre en un porta y deslizando con otro porta sobre la gota.

Materiales empleados:

- Papel de filtro.
- Guantes desechables y bata.
- Una lanceta ( si se realiza la extensión con sangre capilar, por ejemplo: de los dedos de la mano).
- Gasas.
- 2 portas limpios y sin grasa. El porta extensor (con el que se extiende la sangre) es mejor que sea esmerilado y biselado.

- Capilar no heparinizado ( no contiene heparina, un anticoagulante ) si la muestra es de sangre es venosa anticoagulada, o heparinizado ( contiene heparina ), si la muestra es de sangre capilar.
- En vez de utilizar un capilar heparinizado o no puedes emplear una pipeta Pasteur, preferiblemente de vidrio.
- Recipiente para contener la pipeta o el capilar para no manchar la mesa.
- Gradilla.
- Tubo de ensayo ( si utilizamos sangre venosa anticoagulada ).
- Un rotulador de vidrio.

Reactivos utilizados:
- Alcohol etílico.

Muestra específica:

Como he mencionado anteriormente se puede utilizar sangre venosa anticoagulada o sangre capilar, en mi caso, escogí utilizar sangre venosa anticoagulada porque me resulta más fácil hacer las extensiones con pipeta Pasteur de vidrio.

Sangre capilar

Sangre venosa

Forma de extraer sangre capilar:

Primero hay que escoger el tercer o cuarto dedo de una de las manos, desinfectar la zona con una gasa humedecida con algún desinfectante, por ejemplo: alcohol etílico. Cuando se ha evaporado el desinfectante hay que pinchar con la lanceta  firmemente una cara lateral de la yema del dedo y con un poco de gasa desechar la primera gota de sangre. Una vez desechada la primera gota se debe presionar el extremo del dedo, a nivel del lado opuesto al de la punción, hasta obtener la cantidad deseada de sangre.Por último hay que volver a desinfectar la zona.

Forma de obtener sangre venosa anticoagulada:

La sangre venosa tiene que haber sido extraída hace menos de 3 horas, ya que, cuando pasa este tiempo, se producen cambios en las células que se manifiestan al ser teñidas ( las células ), por ejemplo: alteraciones en su morfología.
Cuando se ha extraído la sangre venosa ha de ser anticoagulada con EDTA ( un anticoagulante ).
Para los frotis sanguíneos no debe utilizarse sangre anticoagulada con heparina ( otro anticoagulante ) , ya que agrega las células y produce un fondo azul en las extensiones de sangre teñidas con el colorante de Wright.

Diferencias entre la sangre capilar y la sangre venosa anticoagulada:

Hay que tener en cuenta que una de las diferencias más importantes entre una sangre y otra es que la capilar tiene más eritrocitos y leucocitos y menos plaquetas que la sangre venosa, esto se debe a que los leucocitos tienen un tiempo muy corto de vida y por eso en la capilar como es extraída en el momento los leucocitos pueden llegar a apreciarse, pero la venosa como se encuentra en bolsas y ha sido extraída hace días y además lleva anticoagulante ya no hay leucocitos.

Técnica para realizar extensiones sanguíneas:

1. Lo primero es sujetar con los dedos índice y pulgar de una mano el extremo del porta normal ( porta soporte ) y situarlo sobre la mesa.

2. A continuación con un capilar cargado de sangre mediante capilaridad o con una pipeta Pasteur cargada de sangre, depositamos una gota en la parte derecha del porta soporte a 2 cm del final del porta.

3. Con el extremo del porta extensor formando un ángulo de 45º con el porta soporte....

4.....desplazamos suavemente hacia atrás el porta extensor, hasta alcanzar la gota de sangre.

5. Dejar que la gota se extienda por capilaridad a lo largo del extremo del porta extensor que toca el porta soporte.

6. Antes de que la sangre alcance los bordes de ese extremo hay que deslizar el porta extensor hacia delante, con un movimiento uniforme, firme y a velocidad normal. ( El deslizamiento debe acabar aproximadamente a 1 cm del extremo final del porta soporte con un movimiento de ascensión del porta extensor )

7. Dejar secar la extensión.

8. Por último rotular el  porta soporte con el nombre del enfermo.




Método para mantener limpios los portas:

Los portas en las extensiones sanguíneas deben estar muy limpios y sin grasa de los dedos porque si no es así las extensiones no saldrán bien.

Las indicaciones para mantenerlos limpios son:

-Lavar los portas con agua y jabón líquido. ( También se puede usar alcohol o lejía )

-Aclarar los portas con abundante agua.

-Sumergir los portas en una solución de etanol-éter durante 1 h.

-Volver a aclarar los portas y dejarlos secar. ( Se pueden dejar secar en la estufa de desecación envueltos e papel de filtro).

-Por último cogerlos con cuidado de los bordes para evitar que se manchen otra vez.

Objetivos de la práctica:

-Uno de los principales objetivos  es aprender a hacer extensiones sanguíneas correctamente, sabiendo diferenciar las incorrectas de las correctas.

-Darnos cuenta de por qué las extensiones sanguíneas incorrectas están mal hechas y los errores comunes que se suelen cometer.

-Saber con que sustancia se anticoagula la sangre venosa cuando se pretende hacer una extensión y saber el tiempo máximo que puede pasar desde la extracción de la sangre hasta la realización del frotis o extensión sanguínea.

-Saber el ángulo que debe formar el porta extensor con el porta soporte.

Defectos comunes de una extensión sanguínea:

Extensión sanguínea correcta 

Esta extensión sanguínea es correcta porque se diferencian sus partes: la cola , el cuerpo y la cabeza.
La zona ideal de observación con un microscopio es la zona entre la cola y el cuerpo.

Resultados e interpretación:

Una vez que hemos aprendido a realizar extensiones sanguíneas correctamente y a diferenciar las erróneas y por qué lo son, vamos a dar respuesta a algunas preguntas que nos hemos formulado en el apartado de objetivos de la práctica.

La sangre venosa se anticoagula con una sustancia llamada EDTA, este anticoagulante evita que se formen los coágulos típicos de la sangre.

El tiempo que puede pasar la sangre como máximo desde su extracción hasta la realización del frotis varía dependiendo del tipo de sangre:
La sangre venosa tiene que haber sido extraída hace menos de 3 horas, porque se producen alteraciones en su morfología si pasa más tiempo.
La sangre capilar debe utilizarse al momento porque sino coagula, ya que, normalemente la sangre capilar se extrae con una lanceta y al ser poca sangre se coagula antes.

El ángulo que debe formar el porta extensor con el porta soporte es de aproximadamente 45º.

Errores cometidos:

A continuación voy a mostrar algunas extensiones que no me salieron bien y explicaré por qué no lo están.

Esta extensión tiene demasiada sangre, por eso se me ha quedado bastante sangre al final.

Esta otra tiene zonas sin sangre, esto quiere decir que el porta está sucio o tiene grasa de los dedos.

Esta es demasiado larga y muy fina, sucede porque le falta sangre.

Finalmente podemos decir que ninguna de estas extensiones es válida para ser observada al microscopio porque todas tienen algún defecto que hace que no puedan ser utilizadas.


Bibliografía:

-Libro de hematología.

-www.educa2madrid.org

-www.juntadeandalucia.es

-www.asvidida.org

-www.medicablogs.diariomedico.com