Información sobre la práctica:
En determinados casos está indicada la obtención de un concentrado de leucocitos ( o también llamados glóbulos blancos ).
Esos casos son los siguientes:
-Para obtener y estudiar microscópicamente células patológicas en una leucopenia ( número de leucocitos en la sangre inferior al normal ).
-Obtener células en una leucopenia para la realización de pruebas citoquímicas ( son pruebas que estudian la composición química de las células y sus procesos biológicos moleculares mediante análisis químicos y quimico-físicos que permitan su observación ).
-Obtener células para la búsqueda del corpúsculo de Barr. Éste es la condensación del material genético inactivado de un cromosoma X.
Materiales empleados:
-Papel de filtro.
-Una centrífuga.
-Tubo de centrífuga.
-Tubos de anticoagulante ( citrato sódico ).
-Pipeta Pasteur de vidrio.
-2 Portaobjetos.
-Micropipeta.
-Puntas de micropipeta.
-Frasco lavador.
-Cristalizador.
-Aceite de inmersión.
-Microscopio óptico.
Reactivos:
-Agua destilada.
En este caso yo utilicé la tinción Panóptico rápido.
-Solución nº 1: Solución alcohólica de triarilmetano.
-Solución nº 2: Solución tamponada de xanteno.
-Solución nº 3: Solución tamponada de tiazina.
Resumen:
El frotis se sumerge 5 veces en la solución nº 1, otras 5 veces en la solución nº 2 y por último otras 5 veces en la solución nº 3 .
Enjuagamos con agua destilada del frasco lavador y dejamos secar.
Muestra utilizada:
Sangre venosa anticoagulada con citrato sódico. La proporción que hay que utilizar de anticoagulante es de 0,5 ml de citrato sódico al 3,2 % por cada 4,5 ml de sangre venosa.
Objetivos de la práctica:
-Saber cómo se llama a la condensación del material genético inactivado de un cromosoma X.
-Decir el otro nombre que recibe la capa leucoplaquetaria.
-Al centrifugar la sangre, decir en qué capa se sitúan los hematíes.
Desarrollo:
1.La sangre venosa se deposita en tubos con un anticoagulante llamado citrato sódico.
2.Centrifugamos la sangre anticoagulada a 3.500 r.p.m durante 10 minutos.
3.Retiramos el sobrenadante obtenido ( el plasma) con una micropipeta.
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4.Poniéndole a la micropipeta otra punta desechable, recogemos 0,2 ml ( 200 microlitros ) de la capa leucoplaquetaria ( o buffy coat ).
5. Realizamos un frotis con una gota de la capa leucoplaquetaria o buffy coat sobre un portaobjetos.
6. Una vez seco el frotis, hay que teñir mediante una técnica hematológica tradicional ( Giemsa, Wright, Panóptico rápido, etc ).Para nosotros la mejor opción es el Panóptico rápido porque apenas se tardan 15 segundos en realizarla.
Lectura de resultados:
Al observar al microscopio el frotis de la buffy coat observamos numerosos tipos de leucocitos y múltiples plaquetas, la observamos con el objetivo de inmersión.
Resolución de los objetivos propuestos:
-La condensación del material genético inactivado de un cromosoma X se llama corpúsculo de Barr.
-La capa leucoplaquetaria puede llamarse también buffy coat.
-Al centrifugar la sangre los hematíes se sitúan en la capa inferior.
Valoración de los resultados:
En la sangre estudiada:
No hay leucocitos con alteraciones.
Bibliografía:
- www.biotecnologiaquimicasena.blogspot.com
- www.lymerick.net
- www.biologiahematolog.blogspot.com
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