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martes, 25 de noviembre de 2014

Práctica: Visualización de una cámara de recuento.

Fecha: 20/11/2014

Finalidad de la práctica:

Con esta práctica vamos a conocer la cámara de recuento de Neubauer mejorado y  también cómo observarla al microscopio óptico.

Lo que destaca de esta cámara es que en su cuadrado grande central tiene 25 cuadrados medianos y cada cuadrado mediano contiene en su interior 16 cuadrados pequeños.


Material necesario:

-Un microscopio óptico.
-Cámara de recuento con un retículo de Neubauer mejorado.


Superior (campo  luminoso o campo claro) e inferior (campo oscuro)

















Información sobre la cámara de recuento de Neubauer:

Es un instrumento que se utiliza para el recuento de células en un medio líquido, por ejemplo: sangre.

Es un portaobjetos que tiene dos zonas un poco hundidas en cuyo fondo se marca una cuadrícula cuyas dimensiones se conocen.
Se cubre la cámara con un cubreobjetos que se adhiere especialmente cuando se haya añadido la muestra líquida.
Después, por capilaridad, se introduce el líquido con las células a contar entre la cámara y el cubre.
Por último se observa la retícula al microscopio con el aumento adecuado y se cuentan las células.



Procedimiento:

1. Se observa  el retículo de la cámara de recuento de Neubauer con el microcopio óptico. Primero lo hacemos con el objetivo que tiene el aumento más pequeño (4 x), después, con el de aumento mediano
(10 x) y por último, con el objetivo de gran aumento (40 x).

Este es el retículo completo:





















Con el objetivo de 4 x se observa el retículo completo.
Con el objetivo de 10 x observamos: el cuadrado grande central que  contiene 25 cuadrados medianos y también observamos los 16 cuadrados pequeños que contiene cada cuadrado mediano.




















Por último, con el objetivo de 40 x : observamos un cuadrado mediano del cuadrado grande central que contiene 16 cuadrados pequeños.






















2. A continuación, enfocar con el objetivo de 10 x uno de  los cuadrados grandes que se encuentran en las cuatro esquinas del retículo y contar el número de cuadrados medianos contenidos en ese cuadrado grande periférico:


Pudimos observar 16 cuadrados medianos.


La longitud de cada uno de los lados del retículo es de 3 mm, calcular:


-La longitud de los lados de cada cuadrado grande periférico:


Es de 1 mm, porque cada lado del retículo mide 3mm y hay 3 cuadrados grandes, por lo que para saber la longitud de los lados hay que dividir los 3mm de un lado del retículo entre  los 3 cuadrados grandes.


-La longitud de los lados de cada uno de los cuadrados medianos englobados en un cuadrado grande periférico:


La longitud es 0,25 mm, porque sabemos gracias al apartado anterior que cada lado de cada cuadrado grande mide 1mm y en cada cuadrados grande hay 4 cuadrados medianos por lado, por lo que dividimos un lado del cuadrado grande (1mm) entre los 4 cuadrados medianos que forman un lado del cuadrado grande.


Teniendo en cuenta que la longitud del espacio comprendido entre el retículo y el cubreobjetos es de 0,1mm, hay que calcular el volumen de sangre diluida que hay en la cámara de recuento , a nivel de:


-El retículo entero:


V= l x l x h = 3mm x 3 mm  x 0,1 mm = 0,9 mm cúbicos de sangre diluida.


-Un cuadrado grande periférico:



V= l x l x h = 1mm x 1mm x 0,1 mm = 0,1 mm cúbicos de sangre diluida.


-Un cuadrado mediano incluido en un cuadrado grande periférico:



V= l x l x h = 0,25 mm x 0,25 mm x 0,1 mm = 0,00625 mm cúbicos de sangre diluida.



3. Enfocar, con el objetivo de 10 x , el cuadrado grande central :



-Contar el número de cuadrados medianos contenidos en ese cuadrado grande central:


Tiene 25 cuadrados medianos contenidos en el cuadrado grande central.



-Contar el número de cuadrados pequeños englobados en uno de esos cuadrados medianos:



Contiene cada uno de esos cuadrados medianos 16 cuadrados pequeños.


Teniendo en cuenta que la longitud de cada uno de los lados del retículo es de 3 mm, hay que calcular:



-La longitud de los lados del cuadrado grande central:


Es de 1mm, porque dividimos los 3mm que es lo que mide cada lado del retículo entre los  3 cuadrados grandes que forman un lado de ese retículo.


-La longitud de los lados de cada uno de los cuadrados medianos incluidos en el cuadrado grande central:



Es de 0,2 mm, porque dividimos lo que mide un lado del cuadrado grande (1mm) entre los 5 cuadrados medianos que forman cada lado de ese cuadrado grande central.


-La longitud de los lados de cada uno de los cuadrados pequeños contenidos en uno de esos cuadrados medianos:



Es de 0,05 mm, porque dividimos lo que mide un lado de un cuadrado mediano (0,2mm) entre los 4 cuadrados pequeños que forman cada lado de ese cuadrado mediano.


Teniendo en cuenta que la longitud del espacio comprendido entre el retículo y el cubre es de 0,1 mm, hay que calcular el volumen de sangre diluida que hay en la cámara de recuento a nivel de:



-Un cuadrado grande central:


V= l x l x h = 1 mm x 1mm x 0,1 mm = 0,1 mm cúbicos de sangre diluida.


-Un cuadrado mediano englobado en el cuadrado grande central:



V= l x l  x h = 0,2 mm x 0,2 mm x 0,1 mm = 0,004 mm cúbicos de sangre diluida.


-Un cuadrado pequeño incluido en uno de esos cuadrados
medianos:


V= l x l x h = 0,05 mm x 0,05 mm x 0,1 mm = 0,00025 mm cúbicos de sangre diluida.



Resultados de la práctica:

Finalmente , hemos aprendido a utilizar la cámara de recuento de Neubauer.En la siguiente práctica la utilizaremos para el recuento de eritrocitos de una muestra de sangre.




Bibliografía:

-www.andyoml.blogspot.com

-www.omelsnlozaa.blogspot.com

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