Información sobre la práctica:
La compatibilidad entre donante y receptor es un paso muy importante en las transfusiones sanguíneas.
Se debe confirmar el resultado de la prueba celular con la determinación sérica del grupo sanguíneo (también se puede realizar con plasma).
Fundamento:
El suero o plasma de un individuo solo debe contener anticuerpos (acs) frente a los antígenos (ags) que no están presentes en sus propios hematíes. Por ello, al hacer reaccionar este suero con hematíes tipados de cada grupo, solo producirá aglutinación en el caso de ser enfrentado a eritrocitos con ag distinto a los de sus propios hematíes.
Esta determinación se puede realizar en porta o en tubo, pero se prefiere en tubo porque la centrifugación de los hematíes intensifica la aglutinación.
Material:
-Tubos de hemólisis.
-Pipetas Pasteur.
-Papel de filtro.
-Centrífuga.
-Pipeta graduada de vidrio de 5 ml.
-Rotulador de vidrio.
-Vaso de precipitado.
-Gradilla.
-(Baño de agua).
-Reloj.
Reactivos:
-Suero salino.
-Hematíes tipados del grupo A1,A2, B y 0.
-Hematíes de la sangre problema.
Muestra:
Una opción es suero y la otra opción es plasma.
Objetivos de la práctica:
-Definir los hematíes tipados.
-Decir a qué dilución empleamos los hematíes del paciente.
-Decir qué clase de muestra se emplea en esta técnica.
-Saber qué ocurre cuando el tubo C muestra aglutinación.
Desarrollo de la práctica:
Esta práctica la realizamos de distintas formas, por lo que, voy a ir explicando cada forma de manera individual.
No debemos olvidar que tenemos que hacer un tubo control, lo llamaremos tubo C.
1º. Cuando utilizamos suero calentamos en el baño a 56 ºC durante 10 minutos.
2º. Rotulamos 5 tubos de hemólisis como: A1, A2, B, 0 y C.
3º . De la sangre problema obtenemos el plasma o suero y lavamos 3 veces los hematíes propios de esa sangre problema ( al centrifugar la sangre problema le quitamos el sobrenadante y a lo sedimentado le añadimos 3 ml de suero salino y removemos suavemente).
4º. Centrifugamos a 2.000 r.p.m durante 4 min y desechamos el sobrenadante, nos quedamos solo con 2 gotas de hematíes ( si queremos la solución al 2 % ) o 5 gotas ( si la queremos al 5 %).
5º. En el caso del 2 % también le añadimos 5 ml de suero salino.
6º. Si lo hubieramos hecho al 5 % le añadimos aproximadamente 5 gotas hematíes y aproximadamente 5 ml ( exactamente 4,75 ml ) de suero salino.
7º. Los lavados se realizan 3 veces.
8º. En cada tubo depositamos 2 gotas de suero o plasma problema y 1 gota de suspensión de hematíes que le corresponda a cada tubo. En el tubo C añadimos 1 gota de suspensión de hematíes propios de la sangre problema, ya que nos servirá de control negativo.
9º. Removemos suavemente y centrifugamos a 1.000 r.p.m durante 1 minuto.
10º. Otro intento de esta práctica fue utilizar 4 tipos de sueros , es decir de cada grupo sanguíneo: A1,A2, B y 0.
11º. Utilizamos 16 tubos en total, es decir, 4 para grupo sanguíneo.
Lectura de resultados:
Golpeamos suavemente el fondo del tubo y si aparecen grumos flotando indica aglutinación. En el caso contrario, se observa un líquido homogéneo.
Interpretación clínica de los resultados:
Es difícil confirmar el grupo sanguíneo de recién nacidos porque sus acs aún no están bien desarrollados. También el pacientes con agammaglobulinemia, ya que carecen de acs, y en aquellos que poseen otros acs específicos o inespecíficos capaces de reaccionar con los ags del grupo ABO.
Causas de la discrepancia entre la prueba celular y sérica:
-Debido a errores técnicos.
-Debido a problemas con la muestra.
Resolución de los objetivos propuestos:
-Los hematíes tipados son los hematíes que sabemos de qué grupo sanguíneo son.
-Los hematíes del paciente los empleamos a una dilución del 5 %, aunque también se puede realizar al 2 %.
-En esta técnica se emplea o plasma o suero como muestra.
-Cuando el tubo C presenta aglutinación es que hay autoanticuerpos en el suero y el grupo eritrocitario es ininterpretable.
Resultados obtenidos:
Cuando lo realizamos con los 4 sueros, nos salió en el suero 1: grupo A2, en el suero 2 : grupo B , en el suero 3 : grupo A1B y en el suero 4 : grupo B.
Los resultados teóricos son los siguientes:
Suero 1 : grupo A1.
Suero 2 : grupo 0.
Suero 3 : grupo B.
Suero 4 : grupo A2.
Observaciones de la práctica:
En este caso la interpretación de resultados es distinta, ya que, cuando hay aglutinación es ese el ac presente en el suero.
Ej: Aglutinación en el tubo B, hay anticuerpos Anti-B, por lo que es del grupo sanguíneo A1 (lo de los acs presentes en el suero se pueden ver en la tabla añadida en apartados anteriores).
Bibliografía:
-Libro de Hematología.
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