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martes, 10 de marzo de 2015

Práctica: Determinación del tiempo de protrombina (TP).

Fecha: 05/03/2015.


Información sobre la práctica:

El tiempo de protrombina (TP) es el tiempo que tarda en coagular un plasma pobre en plaquetas (PPP), cuando se pone en contacto con un exceso de calcio y de tromboplastina hística.

El plasma pobre en plaquetas (PPP) , se obtiene al centrifugar sangre anticoagulada a 3.000 rpm durante 10 minutos


Fundamento:

El reactivo utilizado es una mezcla de tromboplastina hística (TH) y de calcio, por lo que recibe el nombre de tromboplastina cálcica.


La tromboplastina hística (TH) procede de extractos de cerebro o de pulmón, de hombre o de animales (normalmente, de conejo o de vaca).


Materiales:

-Papel de filtro.

-Gradilla.

-Frasco lavador.

-Coagulómetro.














-Cubetas de coagulómetro.

-Trocitos de acero para depositar dentro de las cubetas.












-Rotulador de vidrio.

-Micropipeta.

-Puntas de micropipeta.

-Tubos de ensayo de plástico.

-Baño de agua.












Reactivos:

-Agua destilada.

-Tromboplastina cálcica (Hay que reconstruirla con 4 ml de agua destilada). Tiene un ISI ( Índice de Sensibilidad Internacional) de 1,3. Cada reactivo de tromboplastina cálcica comercial puede tener un ISI distintos.














Muestra:

Plasma pobre en plaquetas (PPP) , obtenido al centrifugar sangre anticoagulada a 3.000 rpm durante 10 minutos.


Objetivos de la práctica:

-Decir qué índice expresa la sensibilidad de una tromboplastina hística (TH).


-Decir cómo se llama la ratio de protrombina corregida.


-Saber cuál es el % normal de actividad de la protrombina.


-Decir en qué circunstancias se altera el tiempo de protrombina (TP).


Procedimiento:

1. Atemperar la tromboplastina cálcica a 37 ºC ( en el baño de agua o con el calor de nuestras propias manos, porque necesita alcanzar la temperatura normal de nuestro cuerpo que son 37 ºC).


2. En una cubeta de coagulómetro ponemos un trocito de acero especial para ella.


3. Rotulamos la cubeta con la letra M (de muestra).


4. Verter en esa cubeta 100 microlitros de PPP (plasma pobre en plaquetas).


5. Incubarlo en la placa calefactora del coagulómetro entre 3 y 5 minutos (a más de 5 minutos se evapora el plasma).


6. Ahora debemos utilizar el coagulómetro:


-Encendemos, ponemos con las flechas solo 1 muestra y en PTT.

-Pulsamos Reset y cuando aparezcan en la pantalla 150 segundos pulsamos OK.

-Cuando en la pantalla aparezcan 20 segundos, depositamos la cubeta rotulada con la letra M en el lugar donde está el tapón rojo y tapamos la cubeta con ese mismo tapón.


-Esperamos hasta que en la pantalla ponga 0 y con ayuda de una micropipeta , añadimos 200 microlitros de la tromboplastina cálcica previamente atemperada, debemos evitar tocar el tapón rojo.


-Obtuvimos un tiempo de 5,1 segundos.



Lectura de resultados:

El TP es el tiempo transcurrido desde la adición de la tromboplastina cálcica hasta la formación del coágulo de fibrina.


El resultado también puede expresarse en forma de porcentaje de actividad de la protrombina. Para ello, el valor en segundos del TP determinado en la muestra se interpola en la curva de actividad de la ptrotrombina, previamente preparada, y se halla el procentaje de actividad de la protrombina que le corresponde a éste.


El resultado puede expresarse en forma de cociente o proporción (ratio) entre el valor, en segundos del TP de la muestra y el de un plasma control normal no diluido ( el de 100 % de actividad ).


Este cociente puede ser corregido con el ISI (índice de sensibilidad internacional) de la tromboplastina hísitca, en este caso se denomina INR ( ratio normalizado internacional ) se calcula con la siguiente fórmula:











TP paciente = 13,6 segundos.
TP normal = 12,3 segundos.
ISI = 1,24


                                 1,24
INR = ( 13,6 / 12,3 )     =  1,13


Los valores normales del TP están comprendidos entre 11 y 15 segundos.



Nosotros hemos obtenidos un resultado del TP de 13,6 segundos, por lo que se encuentra dentro de los valores normales.



El porcentaje de actividad de la protrombina de un plasma normal oscila, entre el 70 y el 100 %.



Al observar nuestro TP en la tabla de conversión obtuvimos un porcentaje del 84 % de actividad, también se encuentra dentro de los valores normales.


El ratio de protrombina normal está comprendido entre 0,9  y 1,15.


Obtuvimos un ratio de protrombina de 1,13 ( dentro de los valores normales ).


El ratio entre el TP de la muestra y el TP del control:

El TP de la muestra tiene un ratio de 1,10 y el del control 1,00 ( según la tabla de conversión).


Interpretación clínica de los resultados:

En pacientes con déficits de factores de la vía extrínseca,en enfermos sometidos a terapias con dicumarinas y en pacientes que sufren algunos trastornos hepáticos se obtiene:


-Un tiempo de protrombina (TP) alargado.

-Un porcentaje de actividad de la protrombina disminuido.

-Ratio de la protrombina aumentado.


El tiempo de protrombina está alargado


Valoración de los resultados:

La muestra ensayada tiene un TP:

Normal.


Resolución de los objetivos propuestos:

- El índice que expresa la sensibilidad de una tromboplastina hística es el ISI (índice de sensibilidad internacional).


-La ratio de protrombina corregida se llama INR (ratio normalizado internacional).


-El porcentaje normal de actividad de la protrombina es entre el 70 y el 100 % .


-El tiempo de protrombina (TP) se altera en pacientes con déficits de factores de la vía extrínseca, en enfermos sometidos a terapias con dicumarinas y en pacientes que sufren algunos trastornos hepáticos.



Consejos:

Es importante agitar los reactivos antes de introducirlos con la micropipeta a través del tapón rojo del coagulómetro.







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