Introducción sobre la práctica:
La detección celular del grupo ABO puede realizarse mediante porta o mediante tubo.
En ambos casos, los hematíes problema, contienen sustancias antigénicas (aglutinógenos) del sistema ABO y se enfrentan con antisueros (aglutininas) dirigidos contra esos antígenos.
El resultado final consiste en la aglutinación directa de los eritrocitos cuando reaccionan contra el antisuero correspondiente.
En estos estudios se utilizan anticuerpos anti-A, anti-B y anti-AB que proceden de donantes o que se obtienen mediante la síntesis con hibridomas (Célula híbrida que se obtiene fusionando células plasmáticas con células de mieloma (cancerosas) que tienen la capacidad de crecer y dividirse continuamente) de linfocitos sensibilizados y células de mieloma múltiple (ac.monoclonales*). Sin embargo, como aglutininas anti-A1 o anti-H se utilizan lectinas.
Las lectinas o fitoaglutininas son proteínas presentes en algunas plantas , sobre todo en sus semillas, capaces de aglutinar a los hematíes humanos.
Todas estas determinaciones se deben realizar a tº ambiente, ya que, el calor puede afectar a los hematíes e impedir que se pueda observar su posible aglutinación.
Fundamento:
Estas determinaciones consisten en observar la aglutinación de los hematíes enfrentados a una serie de antisueros conocidos. Sirve para determinar el grupo ABO del individuo.
Material necesario:
-Portaobjetos o tarjeta visualizadora de fondo blanco.
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-Rotulador de vidrio.
-Pipeta Pasteur de plástico.
-Palillos mezcladores.
-Reloj.
-Lanceta.
-Gasas.
Reactivos:
-Alcohol.
-Suero anti-A.
-Suero anti-B.
-Lectina anti-A1.
Muestra:
-Sangre capilar fresca.
Objetivos de la práctica:
-Decir qué tipo de técnica inmunológica se emplea en este análisis.
-Decir la muestra que utilizamos.
-Saber cómo se ve la aglutinación positiva.
-Saber qué debemos hacer cuando el grupo obtenido es A.
Procedimiento:
1º. Debemos dividir un porta en dos secciones con el rotulador. Marca una con la letra A y otra con la B.
2º. Depositamos una pequeña gota de sangre capilar en el centro de cada sección.
3º. A continuación, depositamos al lado de la gota de sangre de la zona A una gota de suero anti-A (azul).
4º. Después, depositamos al lado de la gota de sangre de la zona B una gota de suero anti-B (amarillo).
5º. Mezclar ambas gotas de cada sección utilizando un palillo distinto en cada zona y formando círculos.
6º. Hacer oscilar suavemente el portaobjetos hacia delante y hacia detrás, durante 2 min.
7º. Observar la presencia o no de aglutinación.
Lectura de resultados:
Hay aglutinación cuando aparecen unos grumos rojos que flotan en un líquido claro.En el caso contrario, los hematíes permanecen en forma de suspensión homogénea de color rojizo.
Interpretación clínica de los resultados:
Hemos observado presencia de aglutinación en los hematíes enfrentados con el suero anti-A, por tanto, el grupo sanguíneo de esa persona es A.
En este caso,los hematíes problema deberán ser puestos en contacto con lectina anti-A1; de esta forma , si se produce aglutinación , el sujeto es del subgrupo A1.
Hemos podido comprobar que el sujeto es del subgrupo A1 porque se ha producido aglutinación.
Resolución de los objetivos propuestos:
-En este análisis se emplea la técnica inmunológica en porta.
-En este caso, hemos utilizado como muestra sangre capilar fresca.
-La aglutinación positiva se ve cuando aparecen unos grumos rojos que flotan en un líquido claro.
-Si el grupo obtenido es A, se deben enfrentar los hematíes problema con lectina anti-A1.
Valoración de los resultados:
La sangre analizada es del grupo eritrocitario:
-A, concretamente del subgrupo A1.
Gráfica de los grupos sanguíneos existentes en nuestra clase:
Grupo A1
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Grupo A2
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Grupo B
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Grupo A1B
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Grupo A2B
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Grupo 0
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7
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2
|
7
|
2
|
0
|
7
|
ACTIVIDAD EXTRA:
Determina el grupo sanguíneo de dos muestras de sangre distintas:
Tanto en la muestra 1 como en la muestra 2 no se produjo aglutinación, por lo tanto, las dos muestras pertenecen al grupo 0.
Bibliografía:
-www.glosario.net
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