Práctica: Estudio de un concentrado de leucocitos.

Fecha: 8/01/2015


Información sobre la práctica:


En determinados casos está indicada la obtención de un concentrado de leucocitos ( o también llamados glóbulos blancos ). 


Esos casos son los siguientes:

-Para obtener y estudiar microscópicamente células patológicas en una leucopenia ( número de leucocitos en la sangre inferior al normal ).

-Obtener células en una leucopenia para la realización de pruebas citoquímicas ( son pruebas que estudian la composición química de las células y sus procesos biológicos moleculares mediante análisis químicos y quimico-físicos que permitan su observación ).


-Obtener células para la búsqueda del corpúsculo de Barr. Éste es la condensación del material genético inactivado de un cromosoma X.


Materiales empleados:

-Papel de filtro.

-Una centrífuga.

-Tubo de centrífuga.

-Tubos de anticoagulante ( citrato sódico ).

-Pipeta Pasteur de vidrio.

-2 Portaobjetos.

-Micropipeta.

-Puntas de micropipeta.

-Frasco lavador.

-Cristalizador.

-Aceite de inmersión.

-Microscopio óptico.


Reactivos:

-Agua destilada.

En este caso yo utilicé la tinción Panóptico rápido.

-Solución nº 1: Solución alcohólica de triarilmetano.
-Solución nº 2: Solución tamponada de xanteno.
-Solución nº 3: Solución tamponada de tiazina.

Resumen:

El frotis se sumerge 5 veces en la solución nº  1, otras 5 veces en la solución nº 2 y por último otras 5 veces en la solución nº 3 .

Enjuagamos con agua destilada del frasco lavador y dejamos secar.


Muestra utilizada:

Sangre venosa anticoagulada con citrato sódico. La proporción que hay que utilizar de anticoagulante es de 0,5 ml de citrato sódico al 3,2 % por cada 4,5 ml de sangre venosa.

Objetivos de la práctica:

-Saber cómo se llama a la condensación del material genético inactivado de un cromosoma X.

-Decir el otro nombre que recibe la capa leucoplaquetaria.

-Al centrifugar la sangre, decir en qué capa se sitúan los hematíes.

Desarrollo:

1.La sangre venosa se deposita en tubos con un anticoagulante llamado citrato sódico.

2.Centrifugamos la sangre anticoagulada a 3.500 r.p.m durante 10 minutos.

3.Retiramos  el sobrenadante obtenido ( el plasma) con una micropipeta.

4.Poniéndole a la micropipeta otra punta desechable, recogemos 0,2 ml ( 200 microlitros ) de la capa leucoplaquetaria ( o buffy coat ).

5. Realizamos un frotis con una gota de la capa leucoplaquetaria o buffy coat sobre un portaobjetos.


6. Una vez seco el frotis, hay que teñir mediante una técnica hematológica tradicional ( Giemsa, Wright, Panóptico rápido, etc ).Para nosotros la mejor opción es el Panóptico rápido porque apenas se tardan 15 segundos en realizarla.

Lectura de resultados:

Al observar al microscopio el frotis de la buffy coat observamos numerosos tipos de leucocitos y múltiples plaquetas, la observamos con el objetivo de inmersión.

Resolución de los objetivos propuestos:

-La condensación del material genético inactivado de un cromosoma X se llama corpúsculo de Barr.

-La capa leucoplaquetaria puede llamarse también buffy coat.

-Al centrifugar la sangre los hematíes se sitúan en la capa inferior.

Valoración de los resultados:

En la sangre estudiada:

No hay leucocitos con alteraciones.

Bibliografía:

- www.biotecnologiaquimicasena.blogspot.com

- www.lymerick.net

- www.biologiahematolog.blogspot.com