jueves, 4 de diciembre de 2014

Práctica: Detección de cuerpos de Heinz.

Fecha: 27/11/2014

Información sobre la práctica:

Los cuerpos de Heinz son precipitados de hemoglobina (Hb) que consisten en una serie de pequeñas granulaciones que se sitúan en la periferia de los eritrocitos y que se tiñen con solución de cristal violeta. 



Cuerpos de Heinz (hematologiaenaccion.blogspot.com)











Materiales utilizados:

-Frasco lavador. -Embudo de filtración.
-Tubo de ensayo.
-Filtro de papel de filtro.
-2 pipetas graduadas.
-Pipeta Pasteur.
-Baño de agua.
-2 portas.
-Microscopio óptico.
-Vaso de precipitado.

Reactivos:

-Alcohol o  lejía para limpiar los portas.
-Colorante: cristal violeta (tenemos que prepararlo).
-Líquido de inmersión para observar al microscopio óptico con el objetivo de 100 x.
-Agua destilada.

Muestra:

Nosotros vimos más conveniente realizar la práctica con sangre fresca.

Objetivos de la práctica:

-Decir cuál es el colorante usado para teñir los cuerpos de Heinz.

-Decir también el color de los cuerpos de Heinz cuando se tiñen.

-Saber dónde se localizan los cuerpos de Heinz.

Procedimiento:

1.Tenemos que realizar el colorante. Se hace de la siguiente forma:
-Primero hay que mezclar 20 g de cristal violeta con 80 cc(80 cm cúbicos = 80 ml) de suero fisiológico y 20 cc de agua destilada.
(A nosotros el colorante ya nos venía preparado, pero estaba al 2% y tuvimos que diluirlo al 10%).

-A continuación hay que agitar la mezcla durante 5 minutos.

-Filtrar la disolución con el embudo y el filtro.














-Añadir al líquido filtrado 82 cc de suero fisiológico y 18 cc de agua destilada.

-Al líquido filtrado hay que añadirle la sangre.

-Por último conservar la solución colorante a temperatura ambiente durante un tiempo indefinido.

2.Mezclar en un tubo de ensayo volúmenes iguales de la solución de cristal violeta y de la sangre que vayamos a utilizar. Nosotros lo hicimos con 1 ml de colorante y 1 ml de sangre.














3.Hay que incubar la mezcla a 37 ºC durante 5 minutos en un baño de agua.













4.A continuación hay que realizar una extensión de la mezcla.














Dimos por válida la tercera extensión y la dejamos secar.

5.Observar al microscopio óptico con ayuda del aceite de inmersión con el objetivo de 100 x.



Resolución de los objetivos propuestos:

-El colorante utilizado para teñir los cuerpos de Heinz es el cristal violeta.

-Los cuerpos de Heinz teñidos se observan de un color púrpura intenso.

-Los cuerpos de Heinz los encontramos en la periferia de los eritrocitos.

Resultados obtenidos:

En la sangre ensayada:

-No se han encontrado cuerpos de Heinz.

Valoración de los resultados:

El sujeto estudiado:

-No tiene una Hb inestable.

Interpretación clínica de los resultados obtenidos:

La presencia de cuerpos de Heinz, significa la presencia de precipitados de Hb.Se produce en una serie de defectos congénitos de la Hb , conllevan una alteración en el enlace hemo-globina.


Esta alteración en el enlace da inestabilidad a la hemoglobina, hace que ésta se desnaturalice en presencia de determinados medicamentos (ej: sulfamidas) y que precipite intracelularmente el tetrámero ( 4 cadenas polipeptídicas ) de globina.


También pueden aparecer cuerpos de Heinz en el déficit congénito de glucosa-6-fosfato deshidrogenasa, por precipitación de la Hb oxidada.La oxidación de la Hb puede producirse a causa de diversos productos ( ej: antipalúdicos, analgésicos, habas, etc).


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